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¿Qué es la cromatografía y para qué se utiliza?
La cromatografía es una técnica que permite separar varios componentes de una mezcla haciéndolos migrar a través de una fase líquida o gaseosa sobre una fase estacionaria. Este artículo presenta los principales tipos de cromatografía, con su principio de separación y sus principales indicaciones. En la última parte, propone una comparación de estas diferentes técnicas.
¿Qué es la cromatografía?
En química, la cromatografía es el nombre de un proceso que permite la separación de una mezcla de sustancias mediante la diferente distribución de sus componentes individuales entre una fase estacionaria y una fase móvil.
¿Por qué se necesita la cromatografía?
Los métodos cromatográficos se utilizan para separar mezclas de sustancias y para el análisis cualitativo y cuantitativo. Los métodos modernos de análisis cromatográfico se utilizan para detectar las cantidades más pequeñas de sustancias en criminología, análisis medioambiental, farmacia y análisis de dopaje.
¿Cómo funciona la cromatografia en capa fina?
En la técnica de capa fina, se utiliza un disolvente como fase móvil, que asciende sólo por fuerzas capilares a la fase estacionaria, que debe ser porosa para ello. Al aumentar la altura, la velocidad disminuye porque la gravedad contrarresta las fuerzas capilares.
¿Para qué sirve la cromatografía?
La cromatografía es una técnica analítica que permite determinar la composición de una mezcla por comparación con especies químicas de referencia. Permite confirmar o negar la presencia de una o varias especies químicas en una sustancia.
¿Qué es la cromatografía en columna?
Cromatografía en columna es un término general utilizado para describir muchos tipos de técnicas cromatográficas que utilizan el método de separación en columna. En la cromatografía en columna, se utiliza una columna física con un material de relleno para separar los compuestos. La separación puede basarse en las diferentes propiedades físicas que presentan los compuestos. Estas propiedades pueden ser la carga, el tamaño, la conformación 3D, la capacidad de unión, etc. Así, la columna empaquetada con el material de la matriz sirve como fase estacionaria y el tampón de lavado aplicado a la columna sirve como fase móvil.
Si las moléculas se separan por tamaño, el material de relleno se empaqueta para dejar poros a través de los cuales pueden viajar los compuestos. Así, las moléculas más grandes que no pueden atravesar los poros se eluyen primero, mientras que las más pequeñas tardan mucho más en eluir.
Cromatografía en columna
La cromatografía en columna de adsorción es una parte importante del flujo de trabajo típico para la separación y purificación de productos farmacéuticos, químicos, aromáticos y otros. En primer lugar, la sustancia deseada se sintetiza químicamente o se extrae de plantas, bacterias u otros organismos.
El descubrimiento de la cromatografía en columna con sorbente por parte del botánico ruso-italiano Mikhail Tsvet hace más de 100 años fue la primera forma líquida, un proceso cromatográfico que se utilizó por primera vez para separar pigmentos de las plantas. Desde entonces, las técnicas cromatográficas se han desarrollado rápidamente y se han convertido en un método fundamental utilizado en los laboratorios de síntesis y extracción.
Esta técnica fue desarrollada por el botánico ruso Mikhail TSWET en 1900 cuando intentaba separar la clorofila y los carotenoides (pigmentos vegetales). Hizo una primera demostración de esta técnica en 1901 y acuñó el término “cromatografía” en 1906. La primera cromatografía que realizó no se hizo en una placa, sino en una columna de carbonato de calcio, donde las sustancias coloreadas eran arrastradas por un líquido (eluyente) de etanol.
Principios
Para realizar esta técnica, se deja que un líquido (el eluyente) sea absorbido (por acción capilar) por una placa. En esta placa se deposita una muestra de la mezcla que se va a analizar, junto con una muestra de la especie química cuya presencia se desea verificar. Todas las especies químicas depositadas son arrastradas por el líquido pero a velocidades diferentes: las especies que se encuentran al mismo nivel al final de la cromatografía son, por tanto, las mismas. Las especies químicas de la mezcla forman manchas distintas a diferentes alturas y se identifican localizando las muestras que forman manchas a la misma altura.
Clasificación.
Las fases utilizadas en esta técnica son gases y líquidos. Cuando se utiliza un líquido como fase móvil, se llama cromatografía líquida; cuando se utiliza un gas como fase móvil, se llama cromatografía de gases. En el caso de la fijación cromatográfica, también hay dos estados: el de un sorbente sólido y el de una fase estacionaria que contiene un líquido sobre un monómero estacionario.
Estos métodos se dividen específicamente en tres categorías principales: cromatografía de gases, cromatografía de líquidos y electroforesis capilar generalizada.