El kit de ELISA (ensayo inmunoenzimático) es la tecnología más utilizada en la tecnología de inmunoensayo enzimático.

101Bio ofrece una amplia gama de kits de ensayo inmunoenzimático (Kits de ELISA) para la detección de cientos de proteínas y moléculas diferentes, como citoquinas, factores de crecimiento, marcadores de enfermedades infecciosas, diabetes y tumores, fármacos y pequeñas moléculas, etc.

Estos kits ELISA incluyen placas precubiertas con anticuerpos de captura/detección, estándares, tampones y reactivos accesorios. Cada kit se somete a pruebas de validación y estabilidad para garantizar la precisión, exactitud, sensibilidad, especificidad y reproducibilidad.

La prueba ELISA es un análisis que detecta y mide anticuerpos en la sangre y puede utilizarse para determinar si el paciente tiene anticuerpos relacionados con determinadas enfermedades infecciosas.

Los anticuerpos son proteínas que el organismo produce en respuesta a sustancias dañinas (llamadas antígenos). Se usa en muchos laboratorios para determinar si un anticuerpo particular está presente en la muestra de sangre de un paciente. Aunque el procedimiento es rutinario y sencillo, involucra a un gran número de variables, tales como selección de reactivo, temperatura, medición de volumen y tiempo, que si no se ajustan correctamente, puede afectar los pasos sucesivos y el resultado de la prueba.

El ensayo inmunoenzimático (ELISA), también conocido como inmunoensayo enzimático (EIA), es una técnica bioquímica utilizada principalmente en inmunología para detectar la presencia de un anticuerpo o un antígeno en una muestra. El ELISA se ha utilizado como herramienta de diagnóstico en medicina y fitopatología, así como para el control de calidad en diversas industrias, como la aplicación en la industria alimentaria.

La técnica fue propuesta como una alternativa al radioinmunoensayo, ya que este último suponía un riesgo para la salud debido a los isotopos radiactivos utilizados.

Esta técnica se diferencia de otras basadas en la reacción Ag-Ac en que la unión a una superficie sólida permite la identificación de reacciones específicas y, por lo tanto, la obtención de resultados cuantitativos.

El método ELISA es un punto de referencia para la cuantificación de antígenos patológicos y, de hecho, existen muchas variaciones de este método. Estos se adaptan al cribado de alto rendimiento porque los resultados son rápidos, consistentes y relativamente fáciles de analizar.

Los mejores resultados se han obtenido con el formato de sándwich, utilizando anticuerpos de captura y detector altamente purificados y previamente emparejados. La señal resultante proporciona datos muy sensibles y altamente específicos.

• ELISA directo
• ELISA indirecto
• ELISA inhibidor o competitivo
• ELISA «sándwich»
• ELISPot

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Los kits de ELISA son kits de inmunoensayo listos para usar que contienen todos los reactivos necesarios para realizar el ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas).

ELISA es un experimento basado en placas diseñado para detectar y cuantificar moléculas, como proteínas, anticuerpos, hormonas, péptidos y, a veces, moléculas pequeñas como vitaminas y coenzimas.

Los kits de ELISA utilizan anticuerpos ligados a enzimas para cuantificar los resultados.

Los kits de ELISA tienen un paso clave, la inmovilización del antígeno de interés, se puede lograr mediante adsorción directa a la placa de ensayo o indirectamente mediante un anticuerpo de captura que se ha adherido a la placa.

A continuación, el antígeno se detecta directamente (anticuerpo primario marcado con enzima) o indirectamente (anticuerpo secundario marcado con enzima).

Los anticuerpos de detección suelen estar marcados con fosfatasa alcalina (AP) o peroxidasa de rábano picante (HRP). Se encuentra disponible una gran selección de sustratos para realizar el ELISA con un conjugado de HRP o AP.

La elección del sustrato depende de la sensibilidad del ensayo requerida y de la instrumentación disponible para la detección de señales (espectrofotómetro, fluorómetro o luminómetro).

La detección se logra midiendo la actividad enzimática. Un método es mediante la incubación con sustrato TMB, que puede detectarse mediante la absorbancia de luz del sustrato convertido a 450 nm.

Alternativamente, la enzima puede catalizar un sustrato quimioluminiscente, desencadenando una fuerte reacción luminiscente que puede cuantificarse.

Hay 2 tipos. El Sandwich Elisa más común con anticuerpos captores y detectores o el ELISA directo en el que el antígeno se une en la placa de 96 pocillos. La curva estándar se invertirá en el segundo caso.

Todos los kits de ELISA se almacenan a + 4 * C. Sin embargo, el estándar puede almacenarse a menos 20 * C