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Kits de ELISA
ELISA Kits
¿Qué es un kit de ELISA?
Los kits de ELISA son kits de inmunoensayo listos para usar que contienen todos los reactivos necesarios para realizar el ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas).
ELISA es un experimento basado en placas diseñado para detectar y cuantificar moléculas, como proteínas, anticuerpos, hormonas, péptidos y, a veces, moléculas pequeñas como vitaminas y coenzimas.
Los kits de ELISA utilizan anticuerpos ligados a enzimas para cuantificar los resultados.
¿Cómo funciona el kit ELISA?
Los kits de ELISA tienen un paso clave, la inmovilización del antígeno de interés, se puede lograr mediante adsorción directa a la placa de ensayo o indirectamente mediante un anticuerpo de captura que se ha adherido a la placa.
A continuación, el antígeno se detecta directamente (anticuerpo primario marcado con enzima) o indirectamente (anticuerpo secundario marcado con enzima).
Los anticuerpos de detección suelen estar marcados con fosfatasa alcalina (AP) o peroxidasa de rábano picante (HRP). Se encuentra disponible una gran selección de sustratos para realizar el ELISA con un conjugado de HRP o AP.
La elección del sustrato depende de la sensibilidad del ensayo requerida y de la instrumentación disponible para la detección de señales (espectrofotómetro, fluorómetro o luminómetro).
La detección se logra midiendo la actividad enzimática. Un método es mediante la incubación con sustrato TMB, que puede detectarse mediante la absorbancia de luz del sustrato convertido a 450 nm.
Alternativamente, la enzima puede catalizar un sustrato quimioluminiscente, desencadenando una fuerte reacción luminiscente que puede cuantificarse.
¿Cuántos tipos de ELISA existen?
Hay 2 tipos. El Sandwich Elisa más común con anticuerpos captores y detectores o el ELISA directo en el que el antígeno se une en la placa de 96 pocillos. La curva estándar se invertirá en el segundo caso.
¿A qué temperatura debo guardar un kit de ELISA?
Todos los kits de ELISA se almacenan a + 4 * C. Sin embargo, el estándar puede almacenarse a menos 20 * C
