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Reactivos y herramientas – Abbexa

Introducción

Los reactivos o los tintes fluorescentes, o fluoróforos, son compuestos que absorben luz a una determinada longitud de onda y emiten luz a una longitud de onda superior, produciendo fluorescencia en varios colores. Estos tintes pueden agruparse en categorías como los tintes orgánicos (por ejemplo, fluoresceína, rodamina, AMCA), los fluoróforos biológicos (por ejemplo, proteína verde fluorescente, ficoeritrina, aloficocianina) y los puntos cuánticos.

El uso de fluoróforos o reactivos en el etiquetado y la tinción biológica comenzó ya en la década de 1930, y la comunidad investigadora ha recorrido un largo camino desde entonces. Los biólogos disfrutan ahora de una plétora de colores fluorescentes diferentes. La cantidad de opciones permite no sólo flexibilidad, sino también más oportunidades en lo que se puede detectar y medir en aplicaciones de investigación como la microscopía de fluorescencia, la citometría de flujo y el cribado de alto rendimiento. Algunos aspectos que hay que tener en cuenta a la hora de elegir los tintes fluorescentes son: los espectros de excitación y emisión del fluorocromo, su intensidad relativa, las capacidades del instrumento de obtención de imágenes (como los láseres de excitación y los filtros) y la abundancia del objetivo.

Etiquetado de proteínas

La investigación biológica requiere a menudo el uso de etiquetas moleculares que se unen covalentemente a una proteína de interés para facilitar la detección o purificación de una proteína etiquetada y sus miembros de unión. Las estrategias de etiquetado dan lugar a la unión covalente de diferentes moléculas, como la biotina, las enzimas indicadoras, los fluoróforos y los isótopos radiactivos, a la proteína objetivo o a las secuencias de nucleótidos. Aunque se dispone de varios tipos de etiquetas, sus diversos usos son preferibles para aplicaciones específicas. Por lo tanto, el tipo de etiqueta y la estrategia de etiquetado utilizados deben considerarse cuidadosamente y adaptarse a cada aplicación.

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