Electroforesis en gel
La electroforesis en gel es una técnica molecular fundamental que se utiliza de forma rutinaria en la investigación de las ciencias de la vida para separar y analizar macromoléculas cargadas. Aplicando un campo eléctrico a un medio basado en un gel, se pueden separar y purificar macromoléculas como proteínas y fragmentos de ácidos nucleicos según su tamaño, carga o conformación.
Aunque suelen realizarse como procedimiento analítico tras la PCR, los métodos electroforéticos en gel también han tenido mucho éxito como técnica preparatoria antes del blotting, la clonación, la secuenciación del ADN y otras diversas aplicaciones posteriores.
¿Qué es un gel?
Como su nombre lo indica, en la electroforesis en gel participa un gel: un bloque de material similar a la gelatina. Los geles para separar ADN suelen estar hechos de un polisacárido llamado agarosa, que se consigue como hojuelas secas pulverizadas. Cuando la agarosa se calienta en una solución amortiguadora (agua mezclada con algunas sales) y deja enfriar, se forma un gel sólido ligeramente blando. A nivel molecular, el gel es una matriz de moléculas de agarosa que se mantienen unidas por puentes de hidrógeno y que forman pequeños poros.
Principios de la electroforesis del gel
La técnica de la electroforesis del gel explota la diferencia de tamaño y la carga de diversas moléculas en una muestra. La muestra de la DNA o de la proteína que se separará se carga conectado a un gel poroso colocado en un ambiente iónico del almacenador intermedio. En el uso de la carga eléctrica, cada molécula que tiene diversas talla y carga se moverá a través del gel a diversas velocidades.
El gel poroso usado en esta técnica actúa como criba molecular que separe moléculas más grandes las más pequeñas. Moléculas más pequeñas se mueven más rápidamente a través del gel mientras que los más abultados se dejan detrás. La movilidad de las partículas también es controlada por su carga eléctrica individual. Dos electrodos opuesto cargados que son parte de las moléculas del tirón del sistema hacia de ellas en base de su carga.
Puedes leer más en nuestro blog